藥物研發中穩定性研究是一項重要的研究內容。其中使用期間穩定性試驗是考察包裝制劑對臨床和患者安全使用不可或缺的內容，其主要針對兩部分制劑：

1、使用前需要重新配制的制劑，主要考察藥物在配制或稀釋過程中不同種類、不同形態、不同體積的組分在混合過程中可能會發生各種化學物理變化，從而產生新的降解產物導致雜質譜的改變，以及在配制過程中可能引入的細菌、微生物等新的污染；

2、多劑量包裝制劑，主要是初次使用后會不可避免地接觸到空氣、水分、光等外界因素從而可能影響含量、外觀、產生新的降解產物，重復打開使用和關閉操作也可能導致微生物的污染，細菌繁殖等。對于注射給藥制劑、眼用制劑以及吸入制劑，由于此類制劑對于微生物限度要求較高，如果藥物在使用期間質量不符合要求會造成潛在的安全隱患，因此使用期間穩定性試驗顯得尤為重要。

針對此，EMA、ICH和WHO等均發布了相關指導原則從而有效指導了使用期間穩定性試驗的開展。筆者將從1、批次的選擇及考察時期，2、試驗期間樣品放置條件，3、考察指標，三個方面對各指導原則中穩定性研究的技術要求進行探討并對比，幫助申請人更好的辨別不同申報方向的上市申報的具體要求，更有利于產品的上市注冊申報。

01

批次的選擇及考察時期

EMA和WHO均要求至少考察兩批，其中一批至少為中試規模，至少一批為近效期樣品，若遞交時不能獲得近效期樣品，如果申報時不能獲得近效期樣品，則在申報時可獲得的最后一個時間點取樣考察。EMA同時要求使用的包裝系統應等同于上市包裝系統，針對樣品為多個規格或采用多種包裝材料，可以采用最容易引起變化的規格或包裝，同時給出選擇理由。

ICH要求采用與穩定性試驗相同的主批次，但未明確采用的批次數目。應在長期穩定性開始及試驗結束時取樣考察。如果申報時不能獲得近效期樣品，則在第12個月或申報時可獲得的最后一個時間點取樣考察。

FDA未明確采用的批次數目以及考察時期。

CDE在化學藥品注射劑仿制藥質量和療效一致性評價技術要求里指出，對于穩定性差的產品，臨床配伍穩定性研究應至少包括兩批自制樣品（建議其中一批未近效期樣品），其他產品可采用一批自制樣品。對于生物制品國內尚無明確的法規要求，大多數的生物制品穩定性較差，若按照以上化藥的批次選擇的原則，生物制品上市申報時，是不是也得考察至少兩批自制樣品呢？讓我們拭目以待CDE后續的針對生物制品的法規要求。

02

試驗期間樣品放置條件

EMA和WHO規定應盡可能模擬藥物使用的實際過程，考慮容器的填充體積以及使用前的配制和稀釋過程。如果在實際中需要抽取一定量的藥物或藥液，則試驗時應模擬同樣的情形。取樣測定時應置于實際的使用環境下進行。

ICH和FDA指出，產品復溶或稀釋后的穩定性考察，為說明書中的產品復溶或稀釋配制、存儲條件和使用期限提供依據。

CDE在生物制品穩定性研究技術指導原則以及創新藥（化學藥）III期臨床試驗藥學研究信息指南中均指明，此部分信息應能支持臨床方案中的用法，以評估實際使用情況下產品的穩定性。

綜上，使用期間穩定性樣品的放置條件應盡可能模擬實際的使用過程，包括用法、用量以及待測樣品的放置條件。

03

考察指標

EMA和WHO指出，能反應使用過程中穩定性變化的物理、化學、生物及微生物指標需要被監測，EMA提供示例如下：

物理：顏色、澄清度、包裝完整性、不溶性微粒、粒徑

化學：API含量、防腐劑含量、抗氧劑含量、pH

微生物：總菌落數、無菌

FDA還指出，針對無菌且使用前需要復溶（或進一步稀釋）的產品，申請人需要進行微生物試驗以支持說明書中產品復溶后或稀釋后的最差儲存條件，該試驗作為一項風險評估應能證明復溶后或稀釋后的產品在擬定的儲存條件下，污染的外來微生物不會增長（即增長量不超過0.5log10）。

CDE在多篇已發表的公開文獻中指出，制劑與葡萄糖注射液進行配伍試驗時，需要考察5-羥甲基糠醛的變化情況。從近兩年CDE針對上市申請項目的補充資料通知中也可以看出，凡是與葡萄糖注射液配伍均被要求監測5-羥甲基糠醛的變化情況。

此外，各指導原則均要求，使用期間的穩定性測試所采用的分析方法必須經過驗證（包括國內要求的5-羥甲基糠醛的檢測方法），證明其精密度、靈敏度、準確度和重現性等符合相應的要求。

從以上總結可以看出，不同方向對于使用期間的穩定性具體的要求也不同。在設計使用期間穩定性試驗時，建議按照申報方向的具體要求，同時結合其他方向的要求，模擬真實使用情況，設計合理的試驗策略，全面考察臨床使用期間穩定性。目前國內對使用期間穩定性試驗的具體要求還不是特別明確，尤其是針對生物制品使用期間穩定性試驗的相關要求還有待完善。

關于皓陽生物

杭州皓陽生物技術有限公司成立于2015年，專注于為抗體/重組蛋白客戶提供早期成藥性評估、抗體藥物偶聯開發、穩定細胞株構建、工藝開發、中試生產、IND申報和臨床樣品生產，培養基開發定制等多平臺一站式研發服務。在上海杭州兩地設有研發中心和生產基地，目前擁有員工180余人。上海研發中心依托多種分析手段和瞬時表達平臺為客戶提供從人源化設計，活性分析到成藥性分析多維度的分子設計和評估。杭州中心擁有自主開發可授權的高表達穩定細胞株平臺（皓越）和工藝開發平臺，建有完善的250L和500L規模原液和成品GMP生產線，能夠在8個月左右提供從DNA到毒理批樣品交付，12-15個月內完成IND申報準備工作。同時公司還在建6*2000L商業化生產線，預計于2024年底陸續投入使用。皓陽生物致力于通過幫助新藥研發，推動生物醫藥領域的進步，實現創新為民、科技惠民的目標。

公司立足中國，實踐?“聆聽 深耕 開拓 共贏”的企業精神，努力打造一個行業地位突出，管理先進的現代化企業。